200-074-401凍存袋哪家好-思齊生物-凍存袋哪家好
細胞凍存離心問題
目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養瓶中進行培養,第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除 dmso,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了會受壓過大, 。此外在操作過程中容易污染,200-074-401凍存袋哪家好,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二亞砜(dmso),dmso對細胞有一定的毒*,所以須將離心后的液 體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規的離心分裝的方法進行復蘇,結果無有異常。
凍存袋的基本原理
利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或dmso,可使溶液冰點降低,加之在緩慢*條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。 采用慢凍快融的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min,當溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。
凍存袋細胞復蘇操作步驟
1.操作人員應戴防護面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。
2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。
3.將新鮮培養基置于37℃水槽中回溫,cs50凍存袋哪家好,回溫后噴以70酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。
4.取出冷凍管,立即放入3℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,以7o%酒精擦拭保存管外部,移入無菌操作臺內。
5.取出解凍之細胞懸浮液,緩緩加入有培養基之培養容器內(稀釋比例為1:10~1:15),混合均勻,放入培養箱培養。取0.1m1解凍細胞懸浮液作存活測試。
6.解凍后是否立即去除冷凍保護劑,依細胞種類而異,一般而言,大都不需要立即去除冷凍保護劑。惟若要立即去除,則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10m1培養基之離心管內,離心 1000rpm,5分鐘,移去上清液,凍存袋哪家好,加入新鮮培養基,混合均勻,放入培養箱培養。
200-074-401凍存袋哪家好-思齊生物-凍存袋哪家好由北京思齊生物技術有限公司提供。北京思齊生物技術有限公司位于北京市朝陽區裕民路12號元辰鑫大廈e1-714。在市場經濟的浪潮中拼博和發展,目前思齊生物在其它中享有良好的聲譽。思齊生物取得全網商盟認證,標志著我們的服務和管理水平達到了一個新的高度。思齊生物全體員工愿與各界有識之士共同發展,共創美好未來。